ارائه خدمات پیشرفته آنالیز کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) برای صنایع دارویی، غذایی، زیست‌محیطی و تحقیقاتی.

ما در دیجی شیمی سرویس با بهره‌گیری از تکنیک HPLC، ترکیبات شیمیایی نمونه‌های شما را با بیشترین دقت و حساسیت جداسازی، شناسایی و اندازه‌گیری می‌کنیم. چه برای کنترل خلوص دارو و چه برای شناسایی آلاینده‌ها.

آنالیز HPLC
  • جداسازی دقیق: تفکیک مولکول‌های بسیار مشابه بر اساس تفاوت در برهم‌کنش با فاز ثابت و متحرک.
  • کمی‌سازی و شناسایی: اندازه‌گیری دقیق غلظت (کمی) و تعیین هویت (کیفی) ترکیبات جداشده.
  • فشار عملیاتی بالا: استفاده از پمپ‌های فشار قوی برای افزایش کارایی و سرعت جداسازی.
  • زمان ماندگاری (Retention Time): استفاده از زمان خروج هر ترکیب از ستون به عنوان امضای شناسایی آن.
  • کاربرد وسیع: آنالیز ترکیبات آلی، معدنی، دارویی و زیستی (مانند پروتئین‌ها و ویتامین‌ها).
  • قابلیت اتصال: امکان ترکیب با طیف‌سنج جرمی (LC-MS) برای شناسایی ساختاری دقیق‌تر.
  • آماده‌سازی حلال: استفاده از حلال‌ها و فاز متحرک با خلوص بالا (HPLC Grade) و فیلتر شده.
  • فیلتراسیون نمونه: فیلتر کردن دقیق نمونه پیش از تزریق برای جلوگیری از آسیب به ستون و پمپ.
  • انتخاب ستون: انتخاب نوع ستون (سایز، جنس فاز ثابت) متناسب با ماهیت قطبی یا غیرقطبی نمونه.
  • بهینه‌سازی فاز متحرک: تنظیم دقیق ترکیب حلال‌ها (ایزوکراتیک یا گرادیانت) برای جداسازی بهینه.
  • حجم تزریق: حجم کم و دقیق نمونه تزریقی برای جلوگیری از پهن شدن پیک‌ها و کاهش دقت.
  • کنترل دما: تنظیم دمای ستون برای کاهش ویسکوزیته فاز متحرک و افزایش تفکیک‌پذیری.
  • حالت فیزیکی: نمونه باید به شکل محلول مایع شفاف آماده شده باشد.
  • شرایط فیزیکی: عاری از هرگونه ذرات معلق، آلودگی، یا نمک‌های غیرمحلول (نیاز به فیلتراسیون دقیق).
  • ماهیت ترکیبات: مناسب برای ترکیبات فرّار یا غیرفرّار و گرماحساس (برخلاف GC).
  • حجم مورد نیاز: نیاز به حجم کم، معمولاً 1 تا 5 میلی‌لیتر محلول آماده‌شده.
  • غلظت: غلظت ترکیبات هدف باید در محدوده کاری آشکارساز تنظیم شود.
  • حلالیت: ترکیبات مورد نظر باید در فاز متحرک (یا حلال اولیه) محلول باشند.
HPLC 1200Series

HPLC 1200Series

قابلیت دستگاه : 

  • ستون های موجود در آزمایشگاه: ستون های C18 و C8
  • نوع دیتکتور : UV-VIS
  • فازهای متحرک قابل استفاده: متانول، استونیتریل و آب دیونیزه
  • انواع آنالیزهای قابل انجام: آنالیز انواع داروها، سموم کشاورزی، اسیدهای آمینه، پپتیدهای کوتاه زنجیر و سایر ترکیباتی که آنالیز آنها با HPLC امکان پذیر است.
  • تعداد تزریق: آنالیز هر نمونه در آزمایشگاه با حداقل 3 تکرار انجام می شود.
  • آماده سازی نمونه: در صورتی که نمونه ارسالی نیاز به استخراج داشته باشد هزینه آماده سازی جداگانه محاسبه خواهد شد.

 

مقدار ماده مورد نیاز: 10میلی گرم/10 میلی لیتر

عودت نمونه : ندارد 

 مدت زمان انجام آنالیز ۱۶ روز کاری

درباره آنالیز

خدمات آنالیز کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (High Performance Liquid Chromatograph) (HPLC)

کروماتوگرافی مایع با عملکرد فوق العاده (HPLC) از جدیدترین و رایج ترین تکنیک‌های تجزیه و تفکیک مواد شیمیایی محسوب می‌شود. این روش با بهره‌گیری از ویژگی‌های فیزیکی وشیمیایی مواد، قادر است مولکول‌های مختلف را با دقت بسیار بالایی جدا کرده و سپس آن ها را شناسایی نماید. اساساً HPLC نوعی کروماتوگرافی مایع است که به خاطر مزایایی همچون دقت عملیاتی زیاد، سرعت مناسب و حساسیت قابل توجه در تشخیص، سنجش و جداسازی اجزای تشکیل‌دهنده مواد ، مورد استفاده قرار می‌گیرد.

امروزه، HPLC در صنایع متعددی از جمله داروسازی، مواد غذایی، محیط زیست، و شیمی کاربردهای گسترده‌ای دارد. برای مثال، در صنعت داروسازی برای بررسی خلوص داروها، شناسایی آلاینده‌ها و تجزیه ترکیبات پیچیده استفاده می‌شود.

چرا خدمات آنالیز کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا اهمیت دارد؟

– دقت و حساسیت بالا: قادر به جدا کردن مولکول‌های بسیار مشابه با دقت بالا است. 

– انعطاف‌پذیری: امکان تنظیم شرایط آزمایش برای انواع نمونه‌ها وجود دارد. 

– کاربرد وسیع: از نمونه‌های آلی و معدنی تا زیستی را می‌توان با آنالیز کرد.

اصول و مکانیزم عملکرد خدمات آنالیز کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا

خدمات آنالیز کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) بر اساس جداسازی مولکول‌ها با توجه به تفاوت‌هایشان در جذب و واکنش با دو فاز مختلف انجام می‌شود: فاز ثابت و فاز متحرک. این جداسازی به کمک فشار بالا و ستون‌های کروماتوگرافی با ذرات بسیار ریز انجام می‌شود که سبب افزایش کارایی و دقت آن می‌گردد.

فرآیند جداسازی در HPLC

در روش HPLC، نمونه ابتدا به شکل محلول مایع وارد دستگاه شده و با فشار بالا توسط پمپ به سمت ستون کروماتوگرافی فرستاده می‌شود. داخل ستون از فاز ثابت تشکیل شده که معمولاً شامل ذرات ریز سیلیکا یا پلیمرهای ویژه با ابعاد نانومتری است. مولکول‌های نمونه بسته به ویژگی‌هایی مانند اندازه، بار مولکولی و میزان قطبی بودن، با این فاز ثابت برهمکنش پیدا می‌کنند.

مولکول‌هایی که جذب سطحی قوی‌تری به فاز ثابت دارند، مدت بیشتری در ستون باقی مانده و دیرتر از سیستم خارج می‌شوند. در مقابل، مولکول‌های با چسبندگی کمتر سریع‌تر عبور کرده و زودتر تشخیص داده می‌شوند. این تفاوت در زمان ماندگاری (Retention Time) است که اساس جداسازی ترکیبات را شکل می‌دهد.

نقش فاز متحرک

فاز متحرک که معمولاً یک مایع حلال است، نمونه را از داخل ستون عبور می‌دهد. ترکیب و ویژگی‌های این فاز نقش تعیین‌کننده‌ای در کیفیت جداسازی ترکیبات دارد. بسته به نیاز آزمایش، می‌توان از حلال‌های آبی، آلی یا مخلوطی از آن‌ها استفاده کرد. در نهایت، انتخاب فاز متحرک کاملاً متأثر از ماهیت نمونه و روش کروماتوگرافی مورد استفاده است.

پارامترهای مؤثر در عملکرد خدمات آنالیز کروماتوگرافی مایع

عملکرد خدمات آنالیز HPLC به عوامل متعددی بستگی دارد که مهم‌ترین آن‌ها عبارت‌اند از:

– نوع ستون و اندازه ذرات: ستون‌های با ذرات کوچکتر، جداسازی دقیق‌تر و سریع‌تر انجام می‌دهند. 

– فشار کاری: فشار بالا باعث عبور سریع‌تر نمونه از ستون و افزایش کارایی جداسازی می‌شود. 

– دمای ستون: دمای مناسب باعث بهبود تفکیک و کاهش ویسکوزیته فاز متحرک می‌شود. 

– ترکیب و سرعت جریان فاز متحرک: تنظیم درصد حلال‌ها و سرعت جریان، زمان نگهداری و وضوح جداسازی را تحت تاثیر قرار می‌دهد. 

– حجم نمونه تزریقی: حجم زیاد باعث افزایش پهنای پیک‌ها و کاهش دقت می‌شود. 

قطعات و اجزای اصلی سیستم HPLC

یک سیستم کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) از چند جزء حیاتی تشکیل شده است که با همکاری دقیق، جداسازی و تحلیل نمونه‌ها را ممکن می‌سازند. آشنایی با این قطعات به درک بهتر عملکرد سیستم و نگهداری بهینه آن کمک می‌کند.

۱. پمپ (Pump)

پمپ قلب سیستم HPLC است که وظیفه ایجاد فشار بالا و جریان یکنواخت فاز متحرک را بر عهده دارد. فشار پمپ‌ها معمولاً بین ۵۰ تا ۴۰۰ بار است که باعث می‌شود فاز متحرک با سرعت مناسب از ستون عبور کند.

انواع پمپ‌ها:

– پمپ پیستونی (Reciprocating Pump): معمول‌ترین نوع پمپ در HPLC که دقت جریان بالا دارد. 

– پمپ مکرر (Syringe Pump): برای نمونه‌های کوچک و سیستم‌های خاص استفاده می‌شود.

۲. سیستم تزریق نمونه (Injector)

این قسمت مسئول وارد کردن نمونه به جریان فاز متحرک است. دقت و صحت تزریق نمونه بسیار اهمیت دارد چون حجم و زمان تزریق بر جداسازی تاثیر مستقیم دارد.

انواع سیستم تزریق:

– تزریق دستی 

– تزریق خودکار (Autosampler): برای نمونه‌برداری مکرر و افزایش دقت و سرعت کاربرد دارد.

۳. ستون کروماتوگرافی (Column)

ستون بخش اصلی و کلیدی سیستم است که در آن جداسازی انجام می‌شود. ستون‌ها با قطر و طول‌های متفاوت وجود دارند و بسته به نوع آن، فاز ثابت خاصی دارند.

مشخصات مهم ستون:

– قطر داخلی معمولاً بین ۲ تا ۴.۶ میلی‌متر 

– طول معمول ستون‌ها بین ۵ تا ۲۵ سانتی‌متر 

– جنس فاز ثابت (سیلیکا، پلیمر و غیره) 

۴. آشکارساز (Detector)

آشکارساز پس از خروج نمونه از ستون، ترکیبات جداسازی شده را شناسایی و اندازه‌گیری می‌کند. نوع آشکارساز باید متناسب با ویژگی نمونه و نوع آنالیز انتخاب شود.

انواع آشکارسازها:

– آشکارساز UV-Vis: متداول‌ترین آشکارساز که جذب نور فرابنفش یا مرئی را اندازه می‌گیرد. 

– آشکارساز فلورسانس: برای ترکیبات فلورسانس‌دار کاربرد دارد. 

– آشکارساز هدایت‌سنج (Conductivity Detector): برای آنالیز ترکیبات یونی استفاده می‌شود. 

– آشکارساز جرمی (Mass Spectrometry): ترکیبی از HPLC و طیف‌سنجی جرمی برای شناسایی دقیق مولکول‌ها.

کاربرد های خدمات آنالیز کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا

 

صنایع دارویی

بررسی کیفیت داروها، تشخیص ناخالصی‌های موجود، تجزیه و تحلیل ترکیبات مؤثر و اندازه‌گیری دقیق مقدار آن‌ها . 

صنایع غذایی

تشخیص و سنجش افزودنی‌های غذایی، رنگ‌های مصنوعی، سموم، باقیمانده آفت‌کش‌ها و دیگر مواد آلاینده در محصولات غذایی . 

تحقیقات زیست‌شناسی

تفکیک و شناسایی مولکول‌های زیستی مانند پروتئین‌ها، DNA و RNA، ویتامین‌ها، اسیدهای آمینه و سایر ترکیبات حیاتی .

محیط زیست

آشکارسازی آلاینده‌های خطرناک مانند آفت‌کش‌ها، مواد سمی در آب و خاک، و ترکیبات آلی با ساختار پیچیده . 

صنایع نفت و پتروشیمی

بررسی و تجزیه ترکیبات آلی پیچیده موجود در نفت خام و محصولات پتروشیمی .

صنایع آرایشی و بهداشتی

ارزیابی کیفیت محصولات و تعیین ترکیبات سازنده آن‌ها .

پزشکی قانونی

تشخیص و اندازه‌گیری مواد مخدر و سموم در نمونه‌های بیولوژیکی .

آزمون HPLC

آزمون HPLC یا کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا، روشی پیشرفته و دقیق برای جداسازی، شناسایی و اندازه‌گیری اجزای یک مخلوط است. این تکنیک با استفاده از فشار بالا برای حرکت دادن فاز متحرک (حلال) از داخل ستون حاوی فاز ثابت، عمل جداسازی را با سرعت و دقت بسیار بالایی انجام می‌دهد.

به دلیل حساسیت بالا و توانایی تحلیل ترکیبات غیرفرار و پایدار حرارتی، HPLC در صنایع دارویی، غذایی، شیمیایی و محیط‌زیستی کاربرد گسترده‌ای دارد. این دستگاه با ارائه نتایج سریع و قابل اعتماد، ابزاری ضروری در آزمایشگاه‌های کنترل کیفیت و تحقیقات علمی محسوب می‌شود.

توانایی‌های آنالیز HPLC

آنالیز HPLC یک روش قدرتمند و دقیق برای جداسازی، شناسایی و اندازه‌گیری ترکیبات در نمونه‌های پیچیده است. توانایی‌های این آنالیز عبارتند از:

  • جداسازی و شناسایی دقیق ترکیبات آلی موجود در نمونه‌های مجهول
  • پایش و اندازه‌گیری انواع سموم در محیط‌های زیستی
  • بررسی کیفیت و ترکیبات مواد غذایی
  • آنالیز کمی و کیفی دقیق ترکیبات دارویی
  • جداسازی و تشخیص پروتئین‌ها و مولکول‌های زیستی پیچیده
  • تضمین کیفیت و انطباق استانداردها در داروها، سموم و مواد غذایی
  • شناسایی و تحلیل مایعات غیرفرار
  • کاربرد گسترده در مطالعه اسیدهای آمینه، پروتئین‌ها، اسیدهای نوکلئیک، هیدروکربن‌ها، داروها، ترپنوئیدها، حشره‌کش‌ها، آنتی‌بیوتیک‌ها، استروئیدها و برخی مواد معدنی
  • تعیین غلظت داروها در آزمایش‌های بالینی
  • مقایسه ساختارهای مختلف پروتئین‌ها
  • تعیین ساختار پلیمرها
  • راندمان جداسازی بالاتر نسبت به سایر روش‌های کروماتوگرافی

مشخصات فنی دستگاه آنالیز HPLC

مشخصات فنی سیستم HPLC ارائه شده بر پایه دستگاه‌های Agilent طراحی شده و دارای آشکارساز پیشرفته DAD UV-Vis است. این سیستم مجهز به ستون‌های متنوع جهت پوشش طیف وسیعی از ترکیبات شیمیایی می‌باشد. قابلیت‌های کلیدی آن شامل اندازه‌گیری دقیق سموم آلفاتوکسین در غلظت‌های بسیار پایین (PPM) و شناسایی اوتراتوکسین است. زیرساخت‌های دستگاه شامل آشکارساز آرایه دیودی، دتکتور چند طول موجی، مایکرو واکیوم دگسترر، پمپ دوتایی و ستون ترموستات‌دار، و سل کبرا می‌باشد. این تجهیزات منجر به کارایی بالا در تشخیص سموم و آفت‌کش‌ها، سازگاری سریع برای اندازه‌گیری‌های کمی دقیق و توانایی جداسازی مؤثر مواد غیرفرار یا ناپایدا در برابر حرارت می‌شود.

انواع آنالیز HPLC

تکنیک کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) به دلیل انعطاف‌پذیری و دقت فوق‌العاده، روش‌های متنوعی را برای پردازش و تفسیر داده‌های خروجی فراهم می‌کند. انتخاب روش مناسب تحلیل، مستقیماً به هدف پژوهش و نوع نمونه بستگی دارد. انواع آنالیز HPLC عبارتند از:

  • آنالیز کیفی: این روش بر پایه شناسایی هویت شیمیایی اجزای موجود در نمونه استوار است. با اندازه‌گیری زمان بازداری (Retention Time) برای هر پیک و مقایسه آن با زمان بازداری استانداردهای خالص و شناخته‌شده، می‌توان با اطمینان وجود ترکیب خاصی را در نمونه تأیید کرد.
  • آنالیز کمی: هدف این روش، تعیین مقدار یا غلظت دقیق یک ترکیب مشخص در مخلوط است. با استفاده از ویژگی‌های فیزیکی پیک‌ها، به‌ویژه مساحت زیر نمودار یا ارتفاع قله‌ها در کروماتوگرام، غلظت محاسبه می‌شود.
  • آنالیز پایداری و تخریب: این نوع آنالیز در صنایع دارویی و شیمیایی حیاتی است. با قرار دادن نمونه در شرایط استرس‌زا مانند دما، نور، رطوبت یا تغییرات PH، پایداری شیمیایی ماده بررسی می‌شود.
  • آنالیز ماتریس پیچیده: برای نمونه‌های زیستی و محیطی مانند خون، ادرار یا بافت‌ها که حاوی هزاران ترکیب مختلف هستند، این روش کاربرد دارد. به دلیل تداخلات شدید، این نمونه‌ها نیازمند مراحل آماده‌سازی و پیش‌تصفیه دقیق هستند تا ماتریس‌های مزاحم حذف شده و نتایج دقیق و قابل اتکا ارائه گردد.

تفسیر و خدمات آنالیز HPLC

تفسیر داده‌های کروماتوگرافی، فرآیندی دقیق برای استخراج اطلاعات شیمیایی از خروجی دستگاه است که بر تحلیل الگوها، شدت پیک‌ها و مقایسه با استانداردها استوار خواهد بود. تفسیر آنالیز HPLC به صورت زیر انجام می‌شود:

  • بررسی الگوها: شکل کلی پیک‌ها، نظم زمانی ظهور آن‌ها و تشخیص الگوهای خاص برای درک بهتر ساختار نمونه تحلیل می‌شوند.
  • سنجش شدت: با اندازه‌گیری مساحت زیر پیک‌ها و مقایسه آن با کروماتوگرام‌های استاندارد، مقدار نسبی مواد تعیین می‌شود.
  • تعیین غلظت: با استفاده از کالیبراسیون داخلی یا خارجی، غلظت دقیق ماده مورد نظر محاسبه خواهد شد که در کنترل کیفیت بااهمیت است.
  • شناسایی پیک‌ها: پیک‌های ناشناس را با استانداردهای مرجع تطبیق داده و ترکیبات و ناخالصی‌ها را شناسایی می‌کنند.
  • تحلیل آماری: روش‌هایی مانند تحلیل عاملی و کلوزپ را به‌کار می‌گیرند تا داده‌ها را پردازش کرده و دقت تفسیر را افزایش دهند.

مزایای تست HPLC

روش کروماتوگرافی مایع با عملکرد بالا یا آنالیز HPLC، ابزاری پیشرفته و کارآمد برای جداسازی، شناسایی و اندازه‌گیری دقیق ترکیبات شیمیایی است. این تکنیک به دلیل سرعت، دقت و قابلیت اطمینان بالا، در صنایع مختلف از جمله داروسازی، غذا و محیط زیست کاربرد گسترده‌ای دارد. مزایای این روش عبارتند از:

  • سرعت بالا و صرفه‌جویی در زمان آنالیز
  • دقت و حساسیت فوق‌العاده در اندازه‌گیری‌های کمی
  • امکان بررسی ترکیبات ناپایدار حرارتی و غیرفرار
  • استفاده از دتکتورهای متنوع برای افزایش کیفیت نتایج
  • قابلیت جداسازی و شناسایی پروتئین‌ها و داروها
  • تشخیص ناخالصی‌ها با قطبیت‌های متفاوت و وزن مولکولی بالا
  • عدم تأثیر آب موجود در نمونه بر فرآیند آنالیز
  • ارزیابی پیوندهای هیدروژنی مولکول‌های آب
  • قابلیت تعیین ساختار پلیمرها و مقایسه پروتئین‌ها
  • تکرارپذیری (Reproducibility) عالی نتایج

شرایط خاص و نکات مهم آنالیز HPLC

کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) نیازمند رعایت شرایط فنی و شیمیایی است که عبارتند از:

  • دمای ثابت: کنترل دقیق دمای ستون برای تکرارپذیری زمان بازداری و پایداری واکنش‌ها.
  • فیلتراسیون فاز متحرک: حذف کامل حباب هوا و ذرات معلق برای جلوگیری از آسیب به پمپ و ستون.
  • انتخاب فاز متحرک: تطبیق قطبیت حلال با نمونه و ستون برای بهینه‌سازی جداسازی.
  • کالیبراسیون دوره‌ای: تنظیم مداوم دستگاه با استانداردهای مرجع برای اطمینان از صحت داده‌ها.
  • نگهداری ستون: شستشوی مناسب پس از هر آنالیز برای افزایش عمر مفید و عملکرد دقیق.

روش‌ اندازه‌گیری کیفی در آنالیز HPLC

روش‌های اندازه‌گیری کیفی در آنالیز HPLC بر زمان بازداری مبتنی هستند. زمان بازداری، مدت زمانی است که هر مولکول برای عبور از ستون و رسیدن به آشکارساز نیاز دارد و به دلیل منحصربه‌فرد بودن این زمان برای هر ترکیب، به عنوان شاخص شناسایی عمل می‌کند. برای تشخیص ترکیبات در نمونه‌های مجهول، مراحل زیر دنبال می‌شوند:

  • تهیه محلول استاندارد حاوی ترکیب خالص مورد نظر
  • تزریق استاندارد به دستگاه و ثبت زمان بازداری آن
  • تزریق نمونه مجهول و مقایسه زمان بازداری پیک‌های مشاهده شده با استاندارد
  • در صورت تطابق زمان بازداری، می‌توان نتیجه گرفت که پیک مربوط به همان ترکیب استاندارد است.
  • برای شناسایی چندین ترکیب همزمان، لازم است. استاندارد هر ترکیب به صورت جداگانه تهیه و مقایسه شود.
  • تمامی آنالیزها باید با یک دستگاه و در شرایط آزمایشگاهی یکسان انجام شوند تا نتایج قابل اعتماد و ارزشمند باشند.

روش‌های اندازه‌گیری کمی در آنالیز HPLC

روش‌های اندازه‌گیری کمی در آنالیز HPLC نیز مشابه روش کیفی نیازمند محلول استاندارد هستند. در ابتدا، چند محلول با غلظت‌های مشخص از ماده استاندارد تهیه و وارد دستگاه می‌شوند. سپس، شدت و سطح زیر نمودار پیک‌ها اندازه‌گیری شده و نموداری بر حسب غلظت و سطح زیر نمودار رسم می‌شود.

با استفاده از یک معادله خطی، سطح زیر نمودار ترکیب مورد نظر به غلظت آن مرتبط خواهد شد. در مواردی که ماتریس نمونه بر نتایج تأثیرگذار باشد، مقادیر مشخصی از استاندارد به نمونه اضافه شده و نمودار مساحت زیر نمودار بر حسب غلظت استاندارد اضافه‌شده رسم می‌گردد.

نمونه‌های آنالیز HPLC

کیفیت نتایج آنالیز HPLC مستقیماً به آماده‌سازی دقیق نمونه وابسته است. هیچ دستگاهی نمی‌تواند خطاهای ناشی از نمونه‌برداری نامناسب را جبران کند. این مرحله، حساس‌ترین بخش فرآیند آنالیز و شامل مراحل زیر است:

  • فیلتراسیون: حذف ذرات معلق برای جلوگیری از گرفتگی ستون، آسیب به پمپ و کاهش نویز آشکارساز.
  • رقیق‌سازی: تنظیم غلظت نمونه در محدوده خطی دستگاه برای جلوگیری از اشباع سیگنال یا اعوجاج پیک‌ها.
  • حذف ناخالصی: جداسازی ماتریس‌های مزاحم برای جلوگیری از هم‌پوشانی پیک‌ها و تغییر زمان بازداری.
  • انتخاب حلال: استفاده از حلال سازگار با ستون و آشکارساز جهت تضمین جداسازی صحیح و پاسخ دقیق دستگاه.

هزینه و دقت آنالیز HPLC

امکان‌سنجی فرآیند حدود ۵ روز زمان می‌برد و هزینه‌ها بر اساس هر تزریق و نوع نمونه محاسبه می‌شوند که نمونه استاندارد هزینه جداگانه دارد. پذیرش نمونه مجهول مجاز نیست و در صورت عدم ارائه متد، هزینه متدیابی دریافت می‌گردد. دقت اندازه‌گیری این روش بسیار بالا و قابل اعتماد می‌باشد.

تفسیر طیف HPLC

سیگنال‌های آشکارساز به نرم‌افزار ارسال شده و به پیک‌های کروماتوگرام تبدیل می‌شوند. این پیک‌ها نشان می‌دهند هر ترکیب چه زمانی به آشکارساز رسیده است. آنالیز HPLC به دو صورت کیفی (برای شناسایی وجود ترکیب خاص) و کمی (برای تعیین میزان دقیق ترکیب شناخته‌شده) انجام می‌پذیرد.

تحلیل آنالیز HPLC

روش‌های تحلیل نتایج HPLC بر پایه شناسایی دقیق ترکیبات، کمی‌سازی آن‌ها و کنترل خطاهای سیستماتیک استوار است.

  1. شناسایی ترکیبات: با مقایسه زمان بازداری پیک‌های ناشناس با استانداردهای شناخته‌شده، هویت شیمیایی مواد موجود در نمونه تعیین می‌شود.
  2. کمی‌سازی دقیق: با استفاده از روش استاندارد داخلی یا منحنی کالیبراسیون، غلظت مواد از طریق اندازه‌گیری مساحت پیک‌ها محاسبه می‌گردد.
  3. کنترل عوامل مؤثر: تأثیر پارامترهایی نظیر pH فاز متحرک، دمای ستون و ترکیب حلال‌ها بر زمان بازداری بررسی و بهینه‌سازی می‌شود.
  4. مدیریت خطاها: خطاهای تصادفی و سیستماتیک ناشی از نوسانات فشار، آلودگی ستون یا خرابی تجهیزات شناسایی و با راهکارهای اصلاحی کاهش می‌یابند.
  5. انتخاب آشکارساز: برای افزایش دقت، آشکارساز مناسب مانند UV-Vis، فلورسانس یا جرمی (MS) بر اساس ویژگی‌های نمونه انتخاب می‌شود.
  6. مقایسه استانداردسازی: روش استاندارد داخلی برای کاهش نوسانات تزریق و استاندارد خارجی برای سادگی محاسبات، بسته به نیاز آزمایش انتخاب می‌شوند.

اطلاعات بدست آمده از آنالیز HPLC

ارزیابی اطلاعات در روش HPLC با استفاده از کامپیوتری که برنامه نرم افزاری مربوط به دستگاه HPLC روی آن نصب شده باشد، انجام می گیرد. اغلب برای ارزیابی اطلاعات از سطح زیر پیک ها استفاده می شود.

جمع بندی

خدمات آنالیز کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) به دلیل دقت، حساسیت و قابلیت تطبیق بالا، در بسیاری از حوزه‌های علمی و صنعتی کاربرد گسترده‌ای یافته است. این تکنیک به عنوان یک ابزار اصلی برای جداسازی، شناسایی و تعیین کمی ترکیبات پیچیده به کار میره

سوالات متداول

آیا امکان انجام آنالیز HPLC برای نمونه‌های مجهول وجود دارد؟

خیر، این دستگاه فقط نمونه‌های استاندارد را پردازش می‌کند و نمونه مجهول پذیرفته نمی‌شود.

هزینه آنالیز HPLC چگونه محاسبه می‌شود؟

هزینه بر اساس هر تزریق نمونه و نوع متد درخواستی محاسبه می‌شود و نمونه استاندارد هزینه جداگانه دارد.

آیا امکان‌سنجی فرآیند آنالیز HPLC زمان‌بر است؟

بله، فرآیند امکان‌سنجی حدود ۵ روز زمان می‌برد و پس از آن هزینه و زمان آنالیز اعلام می‌شود.

دریافت مشاوره و ثبت درخواست آنالیز

برای شروع، فرم زیر را تکمیل کنید. کارشناسان ما در کوتاه‌ترین زمان ممکن با شما تماس خواهند گرفت.

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *